人類基因組編碼的518個蛋白激酶中，有許多已經(jīng)成為藥物靶點，如果信號傳導網(wǎng)絡中的這些分子一旦失控，常常導致癌癥和炎癥等疾病。激酶抑制劑是重要的癌癥治療藥物。
以下小優(yōu)給大家匯總一下，激酶靶點藥物活性研究大全！
01
廣篩激酶譜和脫靶效應
優(yōu)寧維提供高品質(zhì)的激酶和激酶譜篩選服務，與日本carna公司合作，這是一家專注提供高品質(zhì)激酶以及激酶檢測服務平臺的公司！其憑借優(yōu)異的激酶品質(zhì)和優(yōu)異的篩選服務深受各大藥企和CRO的青睞！
三大產(chǎn)品線：
1.高品質(zhì)激酶和底物
優(yōu)勢：
★活性保證（大量底物驗證、Host cell評估）
★批次間穩(wěn)定性好
★嚴格質(zhì)控（DNA序列、氨基酸序列嚴格確認）
★活性極高（低至pg級）
2.激酶活性檢測試劑盒
我們提供多種激酶檢測平臺：MSA、FP、TR-FRET、ELISA、ADP-Glo等，每種檢測平臺驗證了多種激酶提供完整試劑盒和操作protocol！
3.激酶篩選檢測平臺
Carna公司擁有擁有專業(yè)的激酶研發(fā)檢測團隊，總共可以做322種激酶篩選（可任意挑選激酶和檢測數(shù)量），也可以做化合物的IC50，亦或化合物的脫靶效應！檢測平臺是Mobility Shift Assay或者IMAP? assay platform，如需激酶產(chǎn)品清單，可上優(yōu)寧維商城查看：
您只要把化合物交給小優(yōu)，我們就給您篩出目的激酶靶點！一步搞定！2-3周即可拿到報告！
同時我們還提供細胞內(nèi)激酶活性檢測服務平臺：NanoBRET? TE Intracellular Kinase Cell-Based Assay Services
02
針對已知目的激酶靶點，篩選化合物
針對已知靶點篩選化合物，這是cisbio公司的專利技術HTRF的特長！HTRF技術不僅是藥篩利器，還是“免洗ELISA”！可針對靶點：GPCR、激酶、表觀酶、蛋白互作及免疫檢查點等，還可高通量檢測胞內(nèi)磷酸化蛋白檢測以及細胞因子和Biomarker等，是做化合物篩選的首選技術！具有特別大的優(yōu)勢，高效、簡單、性價比高！
Cisbio的二種試劑盒（酪氨酸激酶TK和絲蘇氨酸激酶STK）驗證了一百多種激酶，可根據(jù)激酶匹配試劑盒即可！
03
根據(jù)檢測ATP消耗，篩選激酶抑制劑
在激酶檢測反應之后監(jiān)測ATP消耗。easylite-Kinase?是一種檢測試劑，試劑盒中的螢光素和螢光素酶與激酶反應后剩余ATP反應從而發(fā)光，該發(fā)光強度與ATP的剩余量成正比（見圖A）。
在激酶反應的系統(tǒng)中，如果激酶抑制劑可有效抑制激酶活性，則將阻止由激酶導致的ATP消耗，ATP剩余越多則easylite反應產(chǎn)生更強的發(fā)光信號（見圖B）。
發(fā)光檢測的優(yōu)勢在于快速簡便地讀取，而無需具有專用的激發(fā)光源或濾光片的酶標儀。所產(chǎn)生的發(fā)光信號通常會提供較高的信噪比，這樣就能加快檢測速度。
04
非活性激酶的結合抑制劑篩選
根據(jù)結合模式的不同，蛋白激酶小分子一般可分為6大類型。I型ATP競爭性抑制劑，結合活性態(tài)激酶結構域，II型ATP競爭性抑制劑，結合非活性態(tài)激酶結構域，III型競爭結合非ATP口袋附近的別構位點，IV型為競爭結合非ATP口袋遠端的別構位點，V型競爭結合復合位點，如雙底物位點等，VI型非可逆競爭結合ATP口袋位點。
絕大多數(shù)已經(jīng)獲批或正在臨床研究的激酶小分子抑制劑都屬于I型或II型。它們均直接競爭ATP結合部位（以上HTRF KinEASE kit和easylite均篩選的是此類抑制劑）。另一種策略即靶向激酶的非ATP結合位點，從而期望能夠大大提高特異性和克服耐藥性。這類別構抑制劑即為III型或IV型激酶抑制劑。
Cisbio的kinase binding kit可篩選III型或IV型激酶抑制劑，通過競爭法篩選和激酶結合的抑制劑，激酶無需有活性，反應也不需要ATP參加！
檢測原理：選擇待檢測的靶激酶(帶標簽)，試劑盒里有對應的帶能量供體的標簽抗體，以及帶能量受體的陽性Tracer（Inhibitor-Red），當陽性Tracer和激酶以及標簽抗體同時結合時，標簽抗體上的能量供體和陽性Tracer上的能量受體由于距離靠近產(chǎn)生FRET信號，如果待篩選的化合物可與陽性Tracer競爭性結合激酶時，能量供體和能量受體距離拉遠，則FRET信號下降，可用此模型篩選激酶結合抑制劑！
試劑盒里有三個陽性Tracer（Staurosporine、Dasatinib、Sunitinib）可供選擇和優(yōu)化激酶最優(yōu)的結合力，根據(jù)激酶的標簽不同，cisbio有三款不同的標簽激酶結合篩選試劑盒！如下：
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高通量細胞內(nèi)磷酸化蛋白檢測
激酶細胞水平檢測磷酸化蛋白，隆重推出cisbio HTRF檢測試劑盒，高通量免洗ELISA，只需二步操作，Mix & Read即可高效檢測磷酸化蛋白
Cisbio公司的Advanced ERK phospho-T202 /Y204 cellular assay kit是目前市面上靈敏度最高的試劑盒，靈敏度是Western Blot的30多倍，能夠在細胞內(nèi)ERK的基礎磷酸化水平上，進一步檢測pERK的降低。
最后做HTRF實驗必須要用的微孔板
